Coombs Control Cells Preparation from Fresh Blood for Routine Use in Blood Bank Laboratory: A Pilot Study
Abstract
In routine Blood Bank Laboratory, cross-matching is performed for compatible safe blood and diagnosis of Hemolytic Disease caused by various factors which is necessary to use Coombs Control Cells (CCC) as quality control cells for testing. The aim of this study was to prepare in-house IgG sensitized Red Blood Cells (RBC) by using anti-D (IgG) compared with commercial CCC from National Blood Centre, Thai Red Cross Society. Taking 3 ml of Group O Rh(D) positive fresh blood 2 tubes washed in 0.9% NSS 3-5 times or until supernatant was clear. Then, pour supernatant and prepare 10% Pack Red Cells (PRC) in NSS. To determine the best titer, starting with two-fold dilution of anti-D solution (1:2 to 1:512), then adding 10% PRC to each anti-D tube, shake and spin at room temperature. Sensitized RBC was tested with Anti-Human Globulin (AHG) by using Direct Antiglobulin Test (DAT) to test effectiveness of in-house CCC. Potency test of AHG reagents using standard tube test method at 37°C with prepared sensitized RBC showed clearer and stronger agglutination than those tests at room temperature. The reaction demonstrated even with AHG dilution at 1:128 was positive. It was indicated that sensitized RBC prepared in this study had good quality with a shelf life of 15 days. These in-house sensitized RBCs may by suitable for used instead of commercial CCC in laboratory.
References
ดุษฎีภูรีกุล, นุชนาฎ เปรมประยูร, สาริกา เมฆฉาย และอุดม ติ่งต้อ. (2561). ความสัมพันธ์ ของผู้บริจาคโลหิตที่มี DAT บวกกับ autoimmune diseases. ศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย.
ปาริชาติเพิ่มพิกุล. (2561). Direct Antiglobulin Test ที่มีผลบวกในผู้บริจาคเลือด. พิมพ์ครั้งที่ 4. ภาควิชาเวชศาสตร์การธนาคารเลือด คณะแพทยศาสตร์ศิริราชพยาบาล มหาวิทยาลัยมหิดล.
อังสนา โยธินารักษ์. (2562). การเตรียมตัวอย่างเลือดที่ให้ผลบวกสำหรับ Direct Antiglobulin Test เพื่อใช้ในการเรียนการสอนภาคปฏิบัติการในวิชาวิทยาศาสตร์การบริการโลหิต คณะ เทคนิคการแพทย์มหาวิทยาลัยรังสิต. การประชุมวิชาการระดับชาติ มหาวิทยาลัยรังสิต ประจำปีการศึกษา 2562, 26 เมษายน 2562 ณ มหาวิทยาลัยรังสิต จังหวัดปทุมธานี, น. 64- 75.
อภิวันท์ พิพัฒน์วนิชกุล และคณะ (2559). การตรวจพบ Direct Antiglobulin Test ที่ให้ผล เป็นบวกในโลหิตบริจาคและการตรวจติดตามผู้บริจาคโลหิตที่ศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติสภากาชาดไทย. การประชุมวิชาการงานบริการโลหิตระดับชาติ ครั้งที่ 23 ประจำปี พ.ศ. 2559. ฝ่ายตรวจคัดกรองโลหิต ศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย.
Silva, C.D., Araújo, R.D., Machado, B.A., Fior, T., Mattiello, J.M., Meinhart, M., Laurenlisiê, B., Pasqualotti, A., & Lilian Castilho. (2020). Association of positive direct antiglobulin test (DAT) with nonreactive eluate and drug-induced immune hemolytic anemia (DIHA). Transfusion and Apheresis Science. 60 (1), pp. 103015.
Roback, J.D., Coombs, M.R., Grossman, B.J., and Hillyer, C.D. (2008). Antiglobulin test. Technical manual (16th ed.). Bethesda, Maryland United States: AABB.
Samuel R. Theis and Muhammad F. Hashmi. (2021). Coombs Test. Retrieved from https://www.ncbi.nlm. nih.gov/books/NBK547707/
Zantek, N. D., Koepsell, S. A., Tharp, D. R. and Cohn, C. S. (2012). The direct antiglobulin test: A critical step in the evaluation of hemolysis. American Journal of Hematology. 87, pp. 707-709.
